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检测人血清、全血样中内脏利什曼病
广州健仑生物科技有限公司
利什曼病是由利什曼原虫引起的人畜共患病,可引起人类皮肤及内脏黑热病。临床特征主要表现为长期不规则的发热、脾脏肿大、贫血、消瘦、白细胞计数减少和血清球蛋白的增加,如不予合适的治疗,患者大都在得病后1~2年内因并发其他疾病而死亡。本病多发于地中海国家及热带和亚热带地区,以皮肤利什曼病这种形式较为常见。
检测人血清、全血样中内脏利什曼病
【预期用途】
本试剂盒用于体外定性检测人血清盒全血样本中的黑热病(内脏利什曼原虫)病人特异性IgG抗体。内脏利什曼虫病或称黑热病,是由于内脏杜氏利什曼原虫团的利什曼原虫(杜氏利什曼原虫)或利什曼原虫寄生与人体巨噬细胞所引起的一种寄生病,由媒体白蛉叮咬传播。该病在世界内流行甚广,包括亚、欧、非、中、南美洲的60多个国家,每年新发生的病例数约有50万。
【检测原理】
本试剂盒采用胶体金免疫层析技术,检测人血清中的利什曼原虫特异IgG抗体。本试剂盒是用利什么曼原虫纯化抗原IgG抗体分别固相于硝酸纤维金标记得的链球菌G蛋白及其它的试剂制成。当今次那个是,金标记的链球菌G蛋白会与待血清的抗体结合形成复合物,若样本中存在利什曼原虫特异性抗体,该抗体与金标的链球菌G蛋白形成的复合物由于层析作用移动到检测线区域时,则该复合物被固有相与检测线区域内的利什曼原虫捕获而凝聚显色。若血样中没有利什么曼原虫特异抗体,则检测线不显色无论样本中是否存在利什曼原虫特异性抗体,一条色条带都会出现质控区,作为层析过程很正常,试剂是否失效的内控标准。
除此之外本司还有登革热、疟疾、寨卡、西尼罗河、黄热病、基孔肯雅热、莱姆、中东呼吸综合征、钩端螺旋体、幽门螺旋杆菌、大肠杆菌、麻疹/风疹、腮腺炎、布鲁杆菌、炭疽杆菌、巨细胞、EB病毒、狂犬病毒、肠道病毒71型等胶体金法、ELISA抗原抗体检测试剂盒
试验原理:
美国 CorteZ Lishmania-Ab 试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知 LSM-Ab 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将 LSM-Ab 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的 HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物 A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中 LSM-Ab 的浓度呈比例关系。
自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物 A、B 液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物 A 应挥发,避免长时间打开盖子。底物 B 对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD 值。
加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法。
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g 离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g 离心 30 分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g 离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在 37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解。