出血性大肠杆菌O157：H7为革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖，不发酵或迟缓发酵山梨醇。氧化酶阴性。MUG阴性。从分离培养平板上挑取可疑菌苔接种于每种微量生化管内。将已接种的生化管套上无菌塑料帽，直立于三折吸塑短架内，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。注意：如有特殊的接种方式或培养时间，请详见每种生化管附带的使用说明。

表1

产品名称	结果判定		培养时间（小时）	使用说明
产品名称	阳性	阴性
山梨醇	黄色	紫色	8－24
纤维二糖
棉子糖
蛋白胨水	红色	不变色	24	培养后加靛基质试剂2－3滴，立即观察结果。
西蒙氏枸橼酸盐	蓝色	不变色	24－48	用接种针挑取新鲜菌苔在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。
鸟、赖氨酸脱羧酶	试验管蓝绿色，对照管变黄	试验管与对照管均变黄	18－24	每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡5-8滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做终结果判定。
半固体琼脂	扩散生长	无扩散生长	24—48	用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种，竖立培育。
三糖铁琼脂	产酸变黄色，产硫化氢变黑色	不变色	24	用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，穿刺完毕后在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。
葡萄糖磷酸盐胨水	MR：红色	不变色	96	培养后加MR试剂2－3滴，立即观察结果。
葡萄糖磷酸盐胨水	VP：红色	不变色	48	培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。

试验项目	结果判定
山梨醇	阴性或迟缓
纤维二糖	阴性
棉子糖	阳性
蛋白胨水	阳性
西蒙氏枸橼酸盐	阴性
鸟氨酸脱羧酶	阳性
赖氨酸脱羧酶	阳性
半固体琼脂	有动力或无动力
三糖铁琼脂	底及斜面呈黄色H₂S阴性
葡萄糖磷酸盐胨水	MR 阳性 VP 阴性

备注：本鉴定盒是按照产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。

（三）出血性大肠杆菌O157：H7的和生化鉴定特征（见表2）

表2 大肠杆菌O157：H7的生化特征

试验项目	结果判定
山梨醇	阴性或迟缓
纤维二糖	阴性
棉子糖	阳性
蛋白胨水	阳性
西蒙氏枸橼酸盐	阴性
鸟氨酸脱羧酶	阳性
赖氨酸脱羧酶	阳性
半固体琼脂	有动力或无动力
三糖铁琼脂	底及斜面呈黄色H₂S阴性
葡萄糖磷酸盐胨水	MR 阳性 VP 阴性

注：“+” 阳性； “—” 阴性；“＋/－” 阳性或阴性

凡用于上述方法在被检食品中分离获得的纯菌落，经用抗E.coli O157：H7标准血清或EHEC O157：H7。乳胶凝集试剂测试，呈阳性结果即可报告为该食品试样中检出肠出血性大肠杆菌O157：H7。

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